非酒精性脂肪肝疾病成中华民族健康灾难，高脂饮食+草甘膦确凿致非酒精性脂肪肝疾病
12、非酒精性脂肪肝疾病成中华民族与全球人类健康灾难，“高脂饮食+草甘膦残留”确凿致非酒精性脂肪肝疾病
-- 上海市2011年小学生NAFLD检出率为6.5%、从7岁开始即有NAFLD和各项慢性代谢性疾病异常因子的检出”；南宁市2012年超重、肥胖儿童的非酒精性脂肪肝（NAFLD）的发生率为36.7%；西安市2012年“肥胖男性强少年NAFLD检出率71.6%“、”NAFLD总患病率为8.1%“；北京市2012年超重与肥胖儿童NAFLD检出率44.5%"、"男孩发生NAFLD的风险是女孩的9.65倍”；浙江丽水市2015年肥胖儿童NAFLD患病率37.5%“。
--“目前，据估计全世界约有25％的人患有非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD），此外，这些NAFLD患者中的20％至25％将继续发展非酒精性脂肪性肝炎（NASH）。 如果不及时治疗，将发展为肝硬化，随后发生肝衰竭和肝细胞癌的风险将会增加，并最终导致死亡”、“毒素+饮食诱发的模型会迅速诱发新陈代谢破坏和严重的肝损伤”。
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概述
一、结论、理由与依据（简述）
1、《环境污染与毒理学通报》1979年6月发表尼日利亚Ibadan大学生物化学系学者研究确认：“已表明，伴随草甘膦中毒的症状包括直肠温度升高、窒息性抽搐和严重僵死”、“该项研究提出的结果表明，当反应介质缺乏磷酸盐受体时，单次腹膜内给药草甘膦5小时后，草甘膦提高了从大鼠肝脏分离的线粒体的耗氧率。”【证据01】
2、经更严格同行审查后由《欧洲环境科学》2014年6月再次出版法国科学家塞拉里尼《草甘膦除草剂农达与抗草甘膦转基因玉米的长期毒性》:“在雄性处理组中，肝淤血与坏死比对照组高2.5到5.5倍... 雄性大鼠的死亡主要由于严重的肝肾功能不全引起”。【证据02】
3、中国学者1984、2007、2016年研究，证实草甘膦致损伤肝脏及其功能、对肝细胞具有明显的损伤作用、致肝组织结构紊乱。【证据03-证据05】
4、南京医科大学公共卫生学院、江苏省疾病预防控制中心职业病防治所、东南大学公共卫生学院团队2016年研究证实：“草甘膦接触工人的肝脏检查指标出现较高的异常率，草甘膦的暴露可能对长期接触作业人员产生一定的肝损伤”。【证据06】
5、英国、意大利医学家与法国科学家塞拉利尼团队合作2017年发表大鼠暴露超低微量草甘膦除草剂农达两年试验造成肝组织蛋白质严重干扰（检测到1906种中的214种被干扰）、代谢物干扰（检测的673种代谢物中有55种代谢产物发生变化），证实了慢性超低剂量草甘膦除草剂（GBH）暴露引起的肝功能障碍。【证据07】
6、上海新华医院消化内科；北京302医院-香港人与健康丙型肝炎诊治中心等九机构《大中华脂肪肝联盟》团队2017年研究：“慢性乙肝（CHB）组中有1.9％的患者，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）组中有0.6％的患者以及‘慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病’（CHB / NAFLD）组中有5.6％的患者（差异为p = 0.001），自第一次肝活检后平均3.9±3.0年（范围：1-9.6年）发展为肝细胞癌（HCC）。”【证据08】
7、《药理学前沿》2020年12月发表澳大利亚团队研究：“目前，据估计全世界约有25％的人患有非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD），此外，这些NAFLD患者中的20％至25％将继续发展非酒精性脂肪性肝炎（NASH）。 如果不及时治疗，将发展为肝硬化，随后发生肝衰竭和肝细胞癌的风险将会增加，并最终导致死亡”、“毒素+饮食诱发的模型会迅速诱发新陈代谢破坏和严重的肝损伤”。【证据09】
8、江苏大学周培2015年6月硕士论文《非酒精性脂肪肝与肝癌的关系及相关机制的研究》：1）高脂饲料喂养小鼠15周后成功建立出NAFLD动物模型，16周起对小鼠行毒素（二乙基亚硝胺/DEN）干预后36周成功诱导出肝癌（HCC）。2）利用用DEN诱导HCC的过程与人类相似，小鼠在肝癌形成的过程中大致经历了以下三个时期：肝细胞炎性损伤期，肝小叶结构紊乱、肝组织纤维化、肝硬化期，肝癌形成期。3）、高脂饮食组小鼠利用化学毒素（DEN）诱导肝癌（HCC）的成功率（83.3％）明显高于常规饮食组（40％）小鼠。4）非酒精性脂肪肝病（NAFLD）能促进化学毒素（DEN）对肝脏的致癌作用。【证据10】
9、《临床胃肠病学和肝病学》2019年3月加利福尼亚大学圣地亚哥分校家庭医学与公共卫生系、胃肠病学系医学系、医学系非酒精脂肪肝疾病（NAFLD）研究中心、法国里昂大学里昂市民医院医学团队研究确认：“与没有炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH）的患者相比，患有炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH）的患者的草甘膦排泄量显着更高 ... 随着纤维化阶段的增加，草甘膦暴露量的剂量依赖性显着增加。”【证据11】
10、上海市2011年小学生NAFLD检出率为6.5%、从7岁开始即有NAFLD和各项慢性代谢性疾病异常因子的检出”；南宁市2012年超重、肥胖儿童的非酒精性脂肪肝（NAFLD）的发生率为36.7%；西安市2012年“肥胖男性强少年NAFLD检出率71.6%“、”NAFLD总患病率为8.1%“；北京市2012年超重与肥胖儿童NAFLD检出率44.5%"、"男孩发生NAFLD的风险是女孩的9.65倍”；浙江丽水市2015年肥胖儿童NAFLD患病率37.5%“。【证据12-证据16】
11、孟山都公司草甘膦除草剂农达制剂1988年申请“农药登记”提交的毒理学动物试验报告白纸黑字声称“草甘膦除草剂‘农达’...‘三致’试验结果表明该产品无致癌”!【证据17】
12、农业部《转基因权威关注》2011年9月转载《关于大豆中草甘膦残留限量标准情况》到现在持续9年坚持不懈竭力宣扬：“在试验条件下对动物未见致畸、致突变、致癌作用。”【证据18】
13、拜尔公司收购孟山都公司后，草甘膦除草剂2018年向农业部申请续延“农药登记”时，依然谎称“微毒”!【证据19】
14、美国环保署（EPA）官方备忘录证实孟山都1983年与1988年提交了两项代谢研究揭示草甘膦在哺乳山羊与产蛋鸡中有“生物蓄积”致可食用组织草甘膦残留达到“肾脏（3.49-10.5 ppm），肝脏（0.457-0.529 ppm），脂肪和肌肉（0.009-0.011 ppm），奶（0.019-0.086）”【证据20】，即肾脏、肝脏中草甘膦残留达到脂肪肌肉中草甘膦残留317-41倍，表明孟山都草甘膦除草剂农达1988年向中国农业部申请“农药登记”时清楚了解人类肝脏、肾脏是草甘膦除草剂最重点损害的器官，是明知故犯、犯罪故意、涉嫌“以危险方法危害公共安全罪”，必须追究法律责任！
15、众多科学研究证实“高脂饮食+草甘膦毒素”不仅造成非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD），而且加剧向非酒精性脂肪肝炎（NASH）、肝硬化与肝癌发展。为什么国内医学家视而不见拒绝进行草甘膦与NAFLD、NASH相关性“高脂饮食+草甘膦毒素”毒理学慢性喂养研究？
16、农业农村部与拜尔-孟山都内外勾结合伙制造草甘膦“无致癌”【证据17-证据19】与“转基因食品安全”弥天大谎，绑架操控医学界严禁揭露含草甘膦残留“转基因成分食品”摧毁中华民族健康的真相，是中国医学工作者拒绝进行草甘膦与NAFLD、NASH相关性“高脂饮食+草甘膦毒素”毒理学研究，故意将含草甘膦残留“转基因成分食品”完全排除在任何风险因素之外的根本原因！
17）农业部1988年批准孟山都草甘膦除草剂农达“农药登记”、农业农村部2018年批准拜尔/孟山都草甘膦除草剂农达续延“农药登记”，而且自2011年9月以来持续持续9年坚持不懈竭力宣扬：“在试验条件下对动物未见致畸、致突变、致癌作用。”【证据28】，是明知故犯、渎职犯罪，涉嫌“以危险方法危害公共安全罪”，必须追究法律责任！
二、理由与依据（详述）
1、《环境污染与毒理学通报》1979年6月发表尼日利亚Ibadan大学生物化学系学者研究确认：“已表明，伴随草甘膦中毒的症状包括直肠温度升高、窒息性抽搐和严重僵死”、“该项研究提出的结果表明，当反应介质缺乏磷酸盐受体时，单次腹膜内给药草甘膦5小时后，草甘膦提高了从大鼠肝脏分离的线粒体的耗氧率。”
《环境污染与毒理学通报》1979年6月发表尼日利亚Ibadan大学生物化学系Olufunso Oet al.《草甘膦对体内大鼠肝线粒体的影响》【证据01】
已表明，伴随草甘膦中毒的症状包括直肠温度升高、窒息性抽搐和严重僵死（OLORUNSOGO 1976）。 鉴于这些迹象也是由许多化合物引起的，干扰与线粒体中的能量代谢过程有关（DIECHMANN et ai, 1942, PIESS and FIELD 1948, BUFA et ai. 1963, PARKER 1965），尝试研究草甘膦对肝脏线粒体能量守恒过程的体内作用。
该项研究提出的结果表明，当反应介质缺乏磷酸盐受体时，单次腹膜内给药草甘膦5小时后，草甘膦提高了从大鼠肝脏分离的线粒体的耗氧率。这些线粒体的呼吸控制率也降低了。在60 mg / kg时，该参数至少降低了40％。氧化磷酸化的部分反应被认为是偶联机理的可逆性和多步性质的反映。
...呈现的结果表明，用除草剂处理过的动物的肝脏中ATPase活性增强。在草甘膦中毒的动物的肝线粒体中，常见的两个或三个位点底物的脱氢酶活性也略有增强。这些发现表明线粒体氧化磷酸化的解偶联可能是草甘膦中毒的主要病灶。
Olufunso Oet al., Effect of glyphosate on rat liver mitochondriain vivo,
Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology, 1979 Jun;22(3):357-64.
https://link.springer.com/article/10.1007/BF02026955
2、经更严格同行审查后由《欧洲环境科学》2014年6月再次出版法国科学家塞拉里尼《草甘膦除草剂农达与抗草甘膦转基因玉米的长期毒性》:“在雄性处理组中，肝淤血与坏死比对照组高2.5到5.5倍... 雄性大鼠的死亡主要由于严重的肝肾功能不全引起”。
法国科学家塞拉利尼教授领衔《草甘膦除草剂农达与抗草甘膦转基因玉米的长期毒性》2012年9月发表在《食品与化学毒理学》（FCT），但是在力挺转基因学者发动的持续抨击与诽谤运动后2013年11月遭刊物总编撤稿。经更严格同行审查后由《欧洲环境科学》再次出版的法国卡昂大学生物研究所、意大利维罗纳大学神经学、神经心理学、形态系Gilles-Eric Séralini et al.团队该项研究【证据02】
生物化学分析确认非常显著的肾慢性不足，对所有处理组雌雄皆如此；发生改变指标中76%与肾脏相关。在雄性处理组中，肝淤血与坏死比对照组高2.5到5.5倍。
结论：我们的发现意味着必须进行长期（２年）喂养试验才能充分评估转基因食品及其完整商业性配方农药残留的安全性。
雄性大鼠的死亡主要由于严重的肝肾功能不全引起，这证实了在NK603 GM玉米90天喂养试验中观察到的第一个毒性迹象[7]。...
我们发现在雄性鼠肝脏中发生的紊乱是慢性毒性的特征，这一点已通过生化肝脏和肾脏功能参数变化所证实。观察到雌性动物肝功能受到的负面影响较小的原因可能是由于已知的雌激素对氧化应激的保护作用[43]。...
Séralini GEet al., Republished study: long-term toxicity of a Roundup herbicide and a Roundup-tolerant genetically modified maize. Envir.Sciences Europe, 24 Jun 2014, 26(1):14
https://europepmc.org/article/PMC/5044955
3、中国学者1984、2007、2016年研究，证实草甘膦致损伤肝脏及其功能、对肝细胞具有明显的损伤作用、致肝组织结构紊乱。
3-1 贵阳医学院学者团队1984年发表对草甘膦原药三个月亚急性毒性实验毒性研究揭示“750、250 毫克/公斤两组部分动物肝脏可见细胞浊肿和点状坏死，肾小管上皮细胞浊肿、脾淤血等病变，结合肝功能的改变，表明长期接触高剂量草甘膦，对实质器官有一定损害。”
《环境科学》1984年2月发表贵阳医学院朱延韦、蒋宪瑶、覃国芳、蒙顺松、张爱华、葛庆华、姜体蓉、许庭良、梁文妹《新除草剂——草甘膦的毒性研究》【证据03】
三、亚急性毒性实验
1 . 材料和方法
药物：用9.72%的草甘膦工业品水剂，蒸馏水稀释。
动物：体重80-120克的健康大鼠80只， 随机分为五组，每组16只（雌雄各半），设四个给药组，一个对照组，各给药组每天以草甘膦溶液灌胃（每周六天，体积为 1 毫升/100克），剂量为750、250、90、30 毫克/公斤，对照组灌以同体积的蒸馏水。实验期为三个月。...
各脏器的肉眼检查及脏器系数均未发现异常。病理组织学检查，750、250 毫克/公斤两组部分动物肝脏可见细胞浊肿和点状坏死，肾小管上皮细胞浊肿、脾淤血等病变，结合肝功能的改变，表明长期接触高剂量草甘膦，对实质器官有一定损害。
朱延韦、蒋宪瑶、覃国芳，新除草剂——草甘膦的毒性研究，环境科学，1984(2)
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-HJKZ198402014.htm
3-2 东南大学王非2008年11月硕士论文结论：“农达在60mg/L～180mg/L范围内,能引起L-02肝细胞存活率下降，细胞膜通透性增加,抑制细胞离子转运，诱发DNA损伤，线粒体膜电位降低，Cyt C、AIF等凋亡因子泄漏，使细胞产生凋亡和坏死，对肝细胞具有明显的损伤作用；其损伤的作用机制可能与农达导致肝细胞氧化损伤、线粒体崩溃等途径有关。”
东南大学王非2008年11月硕士论文《农达（41％草甘膦）对人L-02肝细胞损伤的研究》【证据04】
体外试验和体内试验都已证明，肝脏(肝细胞)是草甘膦主要的靶器官之一。 肝脏作为体内最大的脏器，具有特殊的生理生化功能和独特解剖结构和特征。肝脏易成为外源性化合物产生的毒作用靶器官。外源性化学物质经过各种途径进入机体后，均可通过血液循环达到肝脏，特别是经消化道吸收的外源性化学物。外源性化学物在肝脏内进行生物转化，在一定条件下，易对肝细胞产生损害作用[10]。
以农达为代表的草甘膦类农药产品用量大，范围广，急性毒性低。正是这个原因，人们更容易忽略其长期毒效应。现有的国内外研究主要集中在草甘膦类农药可能对多种生物机体体内实验中产生的肝脏毒性、生殖毒性、遗传毒性等等，少有研究其体外实验中肝脏及其他系统的代谢、功能和细胞增生影响的机制和途径，以及各个系统对农达和草甘膦的敏感性。肝脏是农达等草甘膦农药的主要靶器官之一，是为更好的了解农达对肝细胞产生的损害及其机制，本实验选取农达为受试物，L．02人类肝细胞为受试对象，系统的研究农达在体外试验中对肝细胞产生的损伤及其机制，期望能确定肝损伤产生的途径和机制，从而更好的为人
类健康服务。
结论: 农达在60mg/L～180mg/L范围内,能引起L-02肝细胞存活率下降,细胞膜通透性增加,抑制细胞离子转运,诱发DNA损伤,线粒体膜电位降低,Cyt C、AIF等凋亡因子泄漏,使细胞产生凋亡和坏死,对肝细胞具有明显的损伤作用;其损伤的作用机制可能与农达导致肝细胞氧化损伤、线粒体崩溃等途径有关。
王非，农达（41％草甘膦）对人L-02肝细胞损伤的研究，
中南大学（硕士论文），2008年11月
http://www.cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10533-2008165795.htm
3-3 南京农业大学动物科技学院学者2016年研究证实：“草甘膦除草剂处理组大鼠肝组织均表现结构紊乱。...肝脏，脾脏和肾脏重量也显著降低 ...草甘膦除草剂（GLP）可引起大鼠肝细胞发生脂质过氧化反应，抗氧化酶被大量消耗，肝组织中脂质过氧化程度增强，自由基的生成与清除这一动态平衡受到破坏，最终导致机体抗氧化能力减弱，引起肝细胞氧化损伤”。
《中国畜牧兽医学会家畜环境卫生学分会2016学术年会论文集》发布南京农业大学动物科技学院唐娟、戴鹏远、李若楠、胡平、李春梅获“江苏省自然基金面上项目（BK20131315）”资助《草甘膦对大鼠肝脏炎症和脂质过氧化相关基因表达的影响》【证据05】
结果：草甘膦除草剂（GLP）处理组大鼠肝组织均表现结构紊乱。在500mg/kg草甘膦除草剂（GLP）处理组内大鼠体重，体增重，平均日采食量，平均日增重和料重比均显著降低（P<0.05）；肝脏，脾脏和肾脏重量也显著降低（P<0.05），血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白介素（IL-1β）水平显著升高（P<0.05），同时血清和肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）水平显著降低，血清中H2O2和CAT显著上升。
RT-PCR结果表明，IL-1α,IL-1β在所有处理组中表达均显著上升，在50，500mg/kg组中肝组织中中IL-6、MAPK3、SIRT1和脂质相关基因PPAR、SREBP、SCR-1表达水平显著升高（P<0.05），而Keap1和DGAT表达水平分别在50mg/kg和500mg/kg处理组中显著升高。
讨论与结论：
谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）是肝细胞损伤的敏感指标，均能反映肝细胞的损伤程度[2]。MDA 作为脂质过氧化降解的产物之一，可以反映体内脂质过氧化的程度及细胞受自由基攻击的程度[3]；超氧化物歧化酶（SOD）作为体内清除活性氧（ROS）自由基中超氧阴离子的专一性抗氧化酶，对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用[4]。我们的研究结果提示草甘膦除草剂（GLP）可引起大鼠肝细胞发生脂质过氧化反应，抗氧化酶被大量消耗，肝组织中脂质过氧化程度增强，自由基的生成与清除这一动态平衡受到破坏，最终导致机体抗氧化能力减弱，引起肝细胞氧化损伤。
唐娟et al., 草甘膦对大鼠肝脏炎症和脂质过氧化相关基因表达的影响，
中国畜牧兽医学会家畜环境卫生学分会2016学术年会论文集，2016
http://cpfd.cnki.com.cn/Article/CPFDTOTAL-XMWS201608001027.htm
4、南京医科大学公共卫生学院、江苏省疾病预防控制中心职业病防治所、东南大学公共卫生学院团队2016年研究证实：“草甘膦接触工人的肝脏检查指标出现较高的异常率，草甘膦的暴露可能对长期接触作业人员产生一定的肝损伤”。
《环境与职业医学》2016年4月发表南京医科大学公共卫生学院、江苏省疾病预防控制中心职业病防治所、东南大学公共卫生学院潘丽萍、张锋、刘庆东、赵秋妮、丁恩民、王博深、朱宝立获“国家卫生标准项目（编号 ：20140701）；江苏省医学领军人才项目（编号 ：LJ201130）”资助《职业接触草甘膦工人肝脏指标分析》【证据06】
结论：草甘膦可能会对接触工人的肝脏造成损伤。... 本次研究发现相比于对照人群，草甘膦接触工人的肝脏检查指标出现较高的异常率，草甘膦的暴露可能对长期接触作业人员产生一定的肝损伤，但需要进行更大样本、更全面的流行病学调查研究。
潘丽萍et al.，职业接触草甘膦工人肝脏指标分析，环境与职业医学，2016，33(4) pp380-384.
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-LDYX201604019.htm
5、英国、意大利医学家与法国科学家塞拉利尼团队合作2017年发表大鼠暴露超低微量草甘膦除草剂农达两年试验造成肝组织蛋白质严重干扰（检测到1906种中的214种被干扰）、代谢物干扰（检测的673种代谢物中有55种代谢产物发生变化），证实了慢性超低剂量草甘膦除草剂（GBH）暴露引起的肝功能障碍。
《自然杂志--科学报告》2017年1月发表伦敦国王学院生命科学与医学学院医学和分子遗传学系基因表达与治疗小组、伦敦国王学院蛋白质组学设施精神病研究所、卡昂大学生物研究所Mesnage Ret al.《长期暴露于超低剂量的农达除草剂后，代谢多组学揭示了大鼠非酒精性脂肪性肝病》【证据07】
低环境相关剂量的草甘膦基除草剂（GBH）对肝脏功能的损害仍然是有争议且尚未解决的问题。先前我们已经证明，以抗消化性血液学检查显示，以0.1 ppb（50 ng / L草甘膦当量稀释度；4 ng / kg体重/天每天摄入量）服用2年的草甘膦基除草剂农达（Roundup GBH）制剂的大鼠显示出肝损伤增强的迹象、血液/尿液生化变化和转录组分析变化。
在这里，我们提出了一项结合代谢组学和蛋白质组学肝分析的多组学研究，以进一步了解由草甘膦除草剂农达引起的病理。与有机氮代谢和脂肪酸β-氧化有关的蛋白质被严重干扰（检测到1906种中的214种被干扰，p<0.05）。蛋白质组紊乱反映了过氧化物酶体增生、脂肪变性和坏死。
代谢组学分析（检测的673种代谢物中有55种代谢产物发生变化，p <0.05），通过显示谷胱甘肽和抗坏血酸自由基清除剂系统的激活确认脂毒性条件和氧化应激。此外，我们发现了与肝毒性相关的代谢物改变，例如γ-谷氨酰二肽、酰基肉碱和脯氨酸衍生物。
这些分子特征的变化与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的生物标志物及其向非炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH）非炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH）的进展基本上重叠。
总体而言，代谢组和蛋白质组紊乱与非酒精性脂肪肝疾病的生物标志物以及其发展为脂肪性肝病的生物学标志物存在实质性重叠，因此证实了慢性超低剂量草甘膦除草剂（GBH）暴露引起的肝功能障碍。
Mesnage Ret al., Multiomics reveal non-alcoholic fatty liver disease in rats following chronic exposure to an ultra-low dose of Roundup herbicide. Sci Report.2017 Jan 9;7:39328.
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28067231/
6、上海新华医院消化内科；北京302医院-香港人与健康丙型肝炎诊治中心等九机构《大中华脂肪肝联盟》团队2017年研究：“慢性乙肝（CHB）组中有1.9％的患者，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）组中有0.6％的患者以及‘慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病’（CHB / NAFLD）组中有5.6％的患者（差异为p = 0.001），自第一次肝活检后平均3.9±3.0年（范围：1-9.6年）发展为肝细胞癌（HCC）。”
《肝病学杂志》2017年1月发表上海新华医院消化内科；第二肝硬化诊治中心；北京302医院-香港人与健康丙型肝炎诊治中心；北京302医院肝衰竭治疗研究中心；香港大学国家级医药生物重点实验室；香港人文与健康医疗中心胃肠及肝脏；南方医科大学南方医院感染科广东省病毒性肝炎研究重点实验室、国家器官衰竭研究国家重点实验室；美国弗吉尼亚联邦大学医学院生理学和分子病理学系；北京302医院转化肝病研究所等机构《大中华脂肪肝联盟》Fan, J et al.《中国慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪肝患者的长期疾病进展》【证据08】
背景与目的：慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病（CHB / NAFLD）很常见，并且在大中华地区呈快速上升趋势。
结果：
慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病（CHB / NAFLD）组进展为肝硬化的患者百分比显着高于慢性乙肝（CHB）组（p <0.001）和非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）组（p <0.001）。
慢性乙肝（CHB）组中有1.9％的患者，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）组中有0.6％的患者以及慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病（CHB / NAFLD）组中有5.6％的患者（差异为p = 0.001），自第一次肝活检后平均3.9±3.0年（范围：1-9.6年）发展为肝细胞癌（HCC）。
与仅慢性乙肝（CHB）的患者相比，慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病（CHB / NAFLD）患者发生肝相关死亡的危险要高得多（HR = 4.9，p = 0.003），而仅非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的患者（调整基线特征后）发生肝相关死亡的危险要低得多
结论：与仅患有CHB的患者相比，合并NAFLD的CHB患者罹患HCC并发生与肝脏相关的死亡的风险更高。
Fan, Jet al., Long-term disease progression in chronic hepatitis B Chinese patients with comorbid nonalcoholic fatty liver disease. J of Hepatology, 66(1), S416–S417.
https://www.onacademic.com/detail/journal_1000039973064710_d41c.html
7、《药理学前沿》2020年12月发表澳大利亚团队研究：“目前，据估计全世界约有25％的人患有非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD），此外，这些NAFLD患者中的20％至25％将继续发展非酒精性脂肪性肝炎（NASH）。 如果不及时治疗，将发展为肝硬化，随后发生肝衰竭和肝细胞癌的风险将会增加，并最终导致死亡”、“毒素+饮食诱发的模型会迅速诱发新陈代谢破坏和严重的肝损伤”。
《药理学前沿》2020年12月发表澳大利亚维多利亚州Monash药物科学研究所药物发现生物学部、澳大利亚维多利亚州Baker心脏与糖尿病研究所、澳大利亚墨尔本大学药理学与治疗学系、澳大利亚Lancaster个性化治疗技术中心澳大利亚研究委员会Cheng Penget al.获澳大利亚奖学金和科学（CASS）基金会等机构基金资助《非酒精性脂肪性肝炎：其机理、模型和药物治疗的综述》【证据09】
肥胖、血脂异常和胰岛素抵抗的日益流行是非酒精性脂肪性肝炎（NASH）发展的主要危险因素（Saklayen, 2018）。 流行病学研究表明，大约82％的NASH患者是肥胖者，83％的患者患有高脂血症，48％的患者被诊断出患有2型糖尿病（Younossi et al., 2016b）。 随着老年患者表现出更多的代谢综合征特征，非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）在中老年患者中更普遍（Frith et al., 2009;Williams et al., 2011）。
非酒精性脂肪性肝炎的流行病学
尽管如此，在13岁以下的儿童/青少年中也诊断出非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）（Goyal and Schwimmer, 2016）。根据美国国家健康与营养考试（National Health and Nutrition Examination）进行的调查，在过去20年中，青少年和年轻人（19-35岁）中NAFLD的发病率上升了约2.5倍（Welsh et al., 2013 ）。更重要的是，纵向随访研究表明，与年龄相称的平均人口相比，被诊断为NAFLD / NASH的青少年患肝硬化和死亡的风险增加（Feldstein et al., 2009;Goyal and Schwimmer, 2016;Doycheva et al., 2017）。
目前，据估计全世界约有25％的人患有非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD），此外，这些NAFLD患者中的20％至25％将继续发展非酒精性脂肪性肝炎（NASH）（Younossi et al., 2016a;Estes et al., 2018）（图1）。 如果不及时治疗，将发展为肝硬化，随后发生肝衰竭和肝细胞癌的风险将会增加，并最终导致死亡（Alexander et al., 2019）。
非酒精性脂肪性肝炎（NASH）引起的肝硬化已被公认为是发展最快的肝病之一，并且是美国肝移植适应症的第二大贡献者（Wong et al., 2015）。 根据当前趋势，到2030年，全球非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）发病率估计为1.01亿人，而到2030年，NASH病例数预计将增加到2700万人（Estes et al., 2018）。
与肥胖症和2型糖尿病的发展与进展同时进行的一项最新研究表明，与非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）相关的年度医疗保健费用在美国约为1030亿美元，在四个欧洲国家（德国，意大利，英国和法国）约为350亿欧元（Younossi et al., 2016a）。 据估计，在十年之内，美国和这些欧洲国家的这些成本将分别升至9080亿美元和3020亿欧元（Younossi et al., 2016a）。 因此，脂肪肝疾病的早期发现、诊断和治疗对于控制这种疾病的影响至关重要。
非酒精性脂肪性肝炎（NASH）由非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）发展而来。目前，估计约有25％的人口患有NAFLD，而估计有25％的NAFLD患者患有NASH。 NASH的典型特征是肝脏脂肪变性炎症和由代谢紊乱（例如肥胖症、糖尿病和血脂异常）驱动的纤维化。 患有严重纤维化的NASH患者发生肝硬化和肝衰竭的风险增加。
目前，非酒精性脂肪性肝炎（NASH）是美国肝脏移植的第二大原因。 更重要的是，最近的研究也强调了由NASH引发肝细胞癌的风险。 在发展为NASH之前，患者可能已经患有非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）多年。 尽管尚未完全理解NASH的发病机理，但当前的“多重打击”假说表明，除了脂肪积聚之外，升高的氧化应激和内质网（ER）应激也可能导致肝脏炎症和纤维化。
对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的临床相关动物模型和药物治疗方法的开发由于对疾病机理的了解有限以及缺乏敏感的、非侵入性的诊断工具而受到阻碍。 当前，大多数临床前动物模型分为三大类，包括：遗传模型，饮食诱导的和毒素+饮食诱导的动物模型。 尽管饮食模型模仿了人类NASH的自然过程，但这些模型通常仅诱发轻度肝损伤。 许多遗传和毒素+饮食诱发的模型会迅速诱发新陈代谢破坏和严重的肝损伤，但并非没有其自身的缺点。
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总体而言，仅通过饮食干预诱导的NASH动物模型需要很长时间才能达到轻度至中度的NASH表型。 中度至重度肝损伤和纤维化等特征可能需要长达20-30周的饮食喂养（Charlton et al., 2011;Clapper et al., 2013）。
但是，动物实验的研究时间越长，由于衰老和与年龄相关的并发症而导致动物死亡的机会就越高。 另外，这种模型耗费资源并且时间效率较低。 因此，正在探索其他替代模型，以试图在较短的时期内引起严重的肝损伤。
饮食和毒素诱导模型
为了增加啮齿类动物NASH模型中肝损伤的严重程度，使用了诸如链脲佐菌素（STZ）（Fujii et al., 2013），二乙基亚硝胺（DEN）（Park et al., 2010）和四氯化碳（CCL4）（Tsuchida等人）之类的毒素（Tsuchida et al., 2018）。
这篇综述概述了“多重打击”假说，并评估了非酒精性脂肪性肝炎（NASH）当前存在的动物模型。 该评价还提供了有关管理NASH的可用干预措施以及当前正在用于NASH治疗的临床试验的药理学的最新信息。
Cheng Penget al., Non-Alcoholic Steatohepatitis: A Review of Its Mechanism, Models and Medical Treatments. Front. Pharmacol., 03 Dec 2020
https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fphar.2020.603926/full
8、江苏大学周培2015年6月硕士论文《非酒精性脂肪肝与肝癌的关系及相关机制的研究》：1）高脂饲料喂养小鼠15周后成功建立出NAFLD动物模型，16周起对小鼠行毒素（二乙基亚硝胺/DEN）干预后36周成功诱导出肝癌（HCC）。2）利用用DEN诱导HCC的过程与人类相似，小鼠在肝癌形成的过程中大致经历了以下三个时期：肝细胞炎性损伤期，肝小叶结构紊乱、肝组织纤维化、肝硬化期，肝癌形成期。3）、高脂饮食组小鼠利用化学毒素（DEN）诱导肝癌（HCC）的成功率（83.3％）明显高于常规饮食组（40％）小鼠。4）非酒精性脂肪肝病（NAFLD）能促进化学毒素（DEN）对肝脏的致癌作用。
江苏大学周培2015年6月硕士论文《非酒精性脂肪肝与肝癌的关系及相关机制的研究》【证据10】
目的：研究非酒精性脂肪肝病（NAFLD）与肝癌（HCC）的关系，并探讨核因子-κB（NF-κB）以及白细胞介素-6（IL-6)在致病机制中的作用。
方法：
1、分组：将实验小鼠随机分为3组:空白对照组取15只小鼠、常规饮食组及高脂饮食组各取45只小鼠。各组小鼠置于动物房适应一周后对空白对照组及常规饮食组小鼠采用基础饲料喂养，高脂饮食组小鼠则给予高脂饲料喂养。
2、动物模型的建立及样本的采集：
高脂饮食组小鼠自由饮用自来水，予高脂饲料喂养15周建立NAFLD模型，饲料脂肪、蛋白质、碳水化合物供能比例分别为42％、20％、38％；常规饮食组及空白对照组小鼠自由饮用自来水，予基础饲料喂养，饲料脂肪、蛋白质、碳水化合物供能比例分别为19％、21％、60％。
16周起高脂饮食组及常规饮食组小鼠予二乙基亚硝胺（DEN）45mg/kg每周一次腹腔注射，空白对照组不予任何药物干预，于建模15周、20周、25周、30周随机选取常规饮食及高脂饮食组每组各5只小鼠，空白对照组随机抽取3只小鼠，收集小鼠血清，完整剖取小鼠肝脏，将肝组织置于10％中性福尔马林溶液中固定，常规切片HE染色光镜下观察肝组织病理改变，36周处死所有小鼠，同上采集各时期各组小鼠血清及肝组织。...
研究结果：
1、一般情况:空白对照组小鼠:进食饮水正常，毛发密而有光泽，体重增长较快，至16周小鼠体重增长趋于平稳；高脂饮食组小鼠及常规饮食组小鼠16周前体重增长呈明显上升的趋势，体重增长稳定，一般情况较好，高脂饮食组小鼠体型肥胖，且各时期体重均明显高于常规饮食组，16周起受致癌剂毒性的影响，小鼠体重增长缓慢且出现下降趋势，小鼠精神萎靡，反应迟钝，摄食减少，活动减少，体型变瘦削，毛发稀疏无光泽，一般情况差，20周起高脂饮食及常规饮食组小鼠体重均低于空白对照组，且进行性下降，但高脂饮食组小鼠的体重始终高于常规饮食组。
2、小鼠NAFLD模型的建立:三组小鼠喂养15周后，高脂饮食组小鼠体型较其他两组明显肥胖，小鼠肝脏体积较其它组略大，包膜紧光滑，边缘变钝，切面外翻，质地柔软，有油腻感，光镜下HE常规病理切片可见肝细胞内聚集了大量的细小脂滴，细胞胞质被脂滴占据呈渔网状，发生脂肪变性的肝细胞呈全小叶分布，可见少量淋巴细胞浸润。空白对照组及常规饮食组小鼠肝细胞胞质内未见有明显的脂滴，肝小叶结构清晰，肝细胞形态正常，排列成单板状结构，细胞间未见有炎细胞浸润。
3、血清肝酶、血脂的测定：实验动物喂养15周后高脂饮食组小鼠血清TG、TC水平较空白对照组有明显升高（P＜0.01），且肝细胞出现损伤，ALT、AST含量升高(P＜0.01)，16周起予致癌剂DEN干预后，小鼠食欲减退，一般情况变差，体重减轻，小鼠血清TG、TC水平下降，常规饮食及高脂饮食组小鼠受致癌剂毒性的影响，20周起小鼠血清ALT、AST出现急剧升高(P＜0.01)，高脂饮食组小鼠各时期血清ALT、AST水平均高于常规饮食组(P＜0.01)，由于肝细胞进行性损伤及坏死，36周小鼠血清ALT、AST较30周有所下降。
4、小鼠血清NF-κB、IL-6的变化：喂养15周后高脂饮食组小鼠血清NF-κB、IL-6水平升高，且明显高于常规饮食组及空白对照组小鼠(P＜0.01)，化学剂DEN干预后实验组小鼠NF-κB、IL-6水平急剧升高，且随着药物时间干预的延长，小鼠体内炎症因子NF-κB、IL-6的表达呈上升趋势，各时期高脂饮食组小鼠血清NF-κB、IL-6的水平始终高于常规饮食组小鼠（P＜0.01）。
5、肝组织致癌过程的动态病理学演变：空白对照组小鼠肝组织在整个造模过程中未出现明显的病理学改变，小鼠肝脏红润、光滑，质软，表面未见结节样增生物及出血坏死灶。光镜下可见肝小叶结构正常，肝细胞未见明显炎症、损伤、坏死及异形增生样改变。36周成功诱导出肝癌，常规饮食及高脂饮食组小鼠在肝癌形成的过程中大致经历以下三期:肝脏炎性损伤期→肝小叶结构紊乱、肝组织纤维化及肝硬化期→肝癌形成期。
6、各组小鼠诱癌成功率的比较：空白对照组小鼠在整个实验过程中未观察到有自发成癌及死亡的现象；常规饮食组小鼠在实验23周、25周、31周、33周各有1、1、2、1只小鼠发生死亡，死亡率为11.1％(5/45)，36周剩余20只小鼠中8只成功诱导为肝癌，诱癌成功率为40％(8/20)；高脂饮食组小鼠于实验21周、23周、28周、29周、33周各有2、1、1、1、2只小鼠发生死亡，死亡率为15.6％(7/45)，36周剩余18只小鼠15只成功诱导为肝癌，诱癌成功率为83.3％(13/18)。
结论:
1、高脂饲料喂养小鼠15周后成功建立出NAFLD动物模型，16周起对小鼠行二乙基亚硝胺（DEN）干预后36周成功诱导出肝癌（HCC）。
2、利用用DEN诱导HCC的过程与人类相似，小鼠在肝癌形成的过程中大致经历了以下三个时期：肝细胞炎性损伤期，肝小叶结构紊乱、肝组织纤维化、肝硬化期，肝癌形成期。
3、高脂饮食组小鼠利用化学剂二乙基亚硝胺（DEN）诱导肝癌（HCC）的成功率（83.3％）明显高于常规饮食组（40％）小鼠。
4、非酒精性脂肪肝病（NAFLD）能促进二乙基亚硝胺（DEN）对肝脏的致癌作用。
5、炎症因子NF-κB、IL-6作为促癌因子其异常表达在非酒精性脂肪肝病（NAFLD）向肝癌（HCC）的进展过程中发挥着重要的作用。
周培，非酒精性脂肪肝与肝癌的关系及相关机制的研究，江苏大学（硕士论文），2015
https://d.wanfangdata.com.cn/thesis/Y2798967
9、《临床胃肠病学和肝病学》2019年3月加利福尼亚大学圣地亚哥分校家庭医学与公共卫生系、胃肠病学系医学系、医学系非酒精脂肪肝疾病（NAFLD）研究中心、法国里昂大学里昂市民医院医学团队研究确认：“与没有炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH）的患者相比，患有炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH）的患者的草甘膦排泄量显着更高 ... 随着纤维化阶段的增加，草甘膦暴露量的剂量依赖性显着增加。”
《临床胃肠病学和肝病学》2019年3月发表加利福尼亚大学圣地亚哥分校家庭医学与公共卫生系、胃肠病学系医学系、医学系非酒精脂肪肝疾病（NAFLD）研究中心、法国里昂大学里昂市民医院Paul J Millset al.《草甘膦的排泄与脂肪性肝病患者的脂肪性肝炎和晚期肝纤维化有关》【证据11】
引言
非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是目前在发达国家中最常见的慢性肝病[1]，非酒精性脂肪性肝炎（NASH）患者被认为具有发展为肝硬化和肝细胞癌较高的纤维化进展的风险。
暴露于杀虫剂和除草剂可能是导致非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）病理生理的环境因素之一[2]。草甘膦是草甘膦除草剂农达（Roundup®）中的主要除草成分，被喷洒到转基因（GM）作物和许多非转基因谷物上，在收获的这些农作物中发现[3]。
长期饲喂低剂量草甘膦的啮齿动物表现出肝毒性、肝充血、坏死和肝细胞DNA损伤[4,5,6]的迹象。本项研究在经过活检证实的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者中，对特征明确且有前瞻性的队列中的草甘膦及其主要代谢产物氨基甲基膦酸（AMPA）的排泄水平进行了研究。
方法
参与者最初是在2012年9月至2018年3月之间于加州大学圣地亚哥分校（UCSD）非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）研究中心进行的一项大型研究的一部分。 如前所述[7]，通过标准化研究访问，包括详细的医学和饮酒史以及人体测量学和体格检查，对怀疑患有非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）并具有肝活检临床指征的患者进行了仔细评估，以评估其他原因引起的肝脂肪变性和肝病。使用非酒精性脂肪性肝炎临床研究网络组织学评分系统进行组织学评分。 在进行统计分析之前，将病例分为确定的炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH），或非炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH）的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）。...
每位患者提供了空腹尿液样本 ... 使用高效液相色谱法结合质谱法分析尿液样品中的草甘膦及其代谢物AMPA。使用公式[（草甘膦+ 1.5）×AMPA]，我们计算了草甘膦残留量，该估算值可提供膳食摄入量和残留量的估计值。...
结果
表1列出了患者的特征。年龄和体重指数（BMI）皆与草甘膦、AMPA或草甘膦残留量无显着相关。 同样，糖尿病状态和种族/种族均与草甘膦，AMPA或草甘膦残留量无显着相关。 尿样草甘膦妇女[0.373μg/ L（SD = 0.41）] 相对于男人[0.215μg/ L（SD = 0.17）（F = 5.18; p = 0.025）]和草甘膦残留物，妇女[0.833μg/ L（SD = 0.67）相对于男性[0.594μg/ L（SD = 0.38）（F = 4.09; p = 0.046）]，比男性高。
讨论
我们报告，与没有炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH）的患者相比，患有炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH）的患者的草甘膦排泄量显着更高。此外，我们还报告，随着纤维化阶段的增加，草甘膦暴露量的剂量依赖性显着增加。
对于不在农业或园艺行业工作的个人，草甘膦暴露的主要途径是通过摄入经草甘膦除草剂农达（Roundup®）处理的转基因食品和/或非转基因作物，例如小麦和燕麦[3]。反映增加了对草甘膦的接触。...
至于草甘膦对肝脏的潜在机制，Mesnage等人的研究（Mesnage et al., 2017）表明草甘膦的老鼠破坏了肝脏的线粒体氧化磷酸化，导致蛋白质组紊乱，反映了过氧化物酶体增殖，脂肪变性和坏死，与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）及其发展为炎性亚型非酒精性脂肪性肝病（NASH）[4]一致。其他研究表明草甘膦抑制脂肪酸氧化并增加脂肪和胆固醇酯，小鼠肝脏中的胆固醇水平升高，导致每克肝脏中脂质含量增加[8]。
Paul J Millset al.,Glyphosate Excretion is Associated With Steatohepatitis and Advanced Liver Fibrosis in Patients With Fatty Liver Disease.
Clin Gastroenterol Hepatol. 2020 Mar;18(3):741-743.
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30954713/
10、上海交通大学医学院附属仁济医院团队研究确认：“2011年9-10月调查上海市2所小学共1 532名在校学生...NAFLD、肥胖、中心型肥胖...的检出率分别为6.5%（99/1532）、26.7%（409/1532）、16.3%(249/1532) ... 中心城区小学中心型肥胖、NALFD检出率显著高于近郊城区小学...受调查人群从7岁开始即有NAFLD和各项慢性代谢性疾病异常因子的检出”.
10-1 《临床儿科杂志》2013年9月发表上海交通大学医学院附属仁济医院临床营养科、超声科张晓敏、万燕萍、张时君、周一泉、韩效艳、刘虹、陈之琦、陆丽萍、汪佳璐、蒋莹、谈韬获“世界健康基金会资助项目(No.AFINS-HOPE- 2011-03)；上海小儿消化营养重点实验室(No.11DZ2260500)；上海市教育委员会上海市学生健康促进工程重大决策咨询课题(No.HJTY-2010-A-09) ”资助《小学生非酒精性脂肪性肝病与慢性代谢性疾病的关系》【证据12】
方法：2011年9-10月调查上海市2所小学共1 532名在校学生，测量体格指标、血压,筛查假性黑棘皮症，及行肝脏超声检查。
结果：NAFLD、肥胖、中心型肥胖...的检出率分别为6.5%（99/1532）、26.7%（409/1532）、16.3%(249/1532)... 中心城区小学中心型肥胖、NALFD检出率显著高于近郊城区小学，差异有统计学意义（P0.01）。...
结论：儿童NAFLD与慢性代谢性疾病关系密切。NAFLD儿童已出现慢性代谢性疾病异常特征，应引起足够重视、加强干预和随访。
讨论：...中心型肥胖及肥胖的检出率分别高达16.3%，26.7%，约有1/4的上海小学生可能存在肥胖问题。且肥胖儿童中NAFLD检出率远高于体质量正常儿童。...受调查人群从7岁开始即有NAFLD和各项慢性代谢性疾病异常因子的检出。
张晓敏et al.，小学生非酒精性脂肪性肝病与慢性代谢性疾病的关系，临床儿科杂志，2013(9)
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-LCAK201309011.htm
10-2 2012年“南宁市超重、肥胖儿童的非酒精性脂肪肝（NAFLD）的发生率为36.7%”、“非酒精性脂肪肝（NAFLD）发病机制目前尚不十分明确，大多数学者认为NAFLD与胰岛素抵抗（IR）存在着共同的病因学基础”
《中国儿童保健杂志》2012年2月发表广西壮族自治区妇幼保健院儿科范歆、陈少科、唐晴、罗静思、冯莹获“十一五国家科技支撑计划项目(2009BAI80B00)；广西自然科学基金项目(0832184)”资助《南宁市超重、肥胖儿童非酒精性脂肪肝患病情况分析》【证据13】
随着儿童超重、肥胖在全球的快速流行，非酒精性脂肪肝（NAFLD）已成为许多地区儿童青少年人群中最主要的慢性肝病[1-2]，不同地区报道患病率存在差异，普通儿童NAFLD的发生率为2.6% - 3.2%，肥胖儿童NAFLD的发生率可达22.5% -65.9%[3]。
结果：180例患儿中B超明确脂肪肝66例（男42例,女24例）,非脂肪肝114例（男64例,女50例），非酒精性脂肪肝（NAFLD）检出率为36.7%（66/180），其中男童检出率为39.6%（42/106），女童检出率为32.4%（24/74），男女差异无统计学意义（x2=0.394,P=0.319)；脂肪肝组体质指数、腰围、血压、血脂等指标均高于非脂肪肝组。
结论：南宁市超重、肥胖儿童的非酒精性脂肪肝（NAFLD）的发生率为36.7%，控制儿童超重、肥胖的发生,是防治儿童青少年NAFLD的重要措施；谷丙转氨酶能否用于超重、肥胖儿童NAFLD早期识别的依据值得探讨。
讨论
非酒精性脂肪肝（NAFLD）发病机制目前尚不十分明确，大多数学者认为胰岛素抵抗（IR）和肝脏脂肪累积起关键作用；NAFLD与胰岛素抵抗（IR）存在着共同的病因学基础[10]，两者的相关性独立于体质指数（BMI=体重/身高2）、脂肪分布和糖耐量异常之外[11]，并将NAFLD作为代谢综合征的组成部分。
本研究中，脂肪肝组及非脂肪肝组的体质指数（BMI）、腰围、臀围、血压、谷丙转氨酶（ALT）)、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）及胰岛素抵抗（IR）指数、代谢综合症（MS）发生率都存在显著性差异，脂肪肝组明显高于非脂肪肝组，提示在非酒精性脂肪肝（NAFLD）形成过程中，肥胖、脂代谢异常、胰岛素抵抗（IR）起着重要作用。
南宁市超重、肥胖儿童非酒精性脂肪肝患病情况分析，中国儿童保健杂志，2012(2)
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ERTO201202010.htm
10-3西安医学院第一附属医院2012年体检青少年4141例青少年：“NAFLD总患病率为8.1%（335/4141）,其中男生NAFLD患病率高于女生（13.4%vs 2.8%）...肥胖男生NAFLD检出率显著高于女生（71.6%vs 29.0%）...结论：西安地区青少年肥胖、NAFLD发病情况不容乐观”。
《临床肝胆病杂志》2015年8月发表西安医学院第一附属医院消化内科、消化内科赵鸿馨、闫蓉、牛春燕、周永莉、王佳、曹瑞琪获“陕西省教育厅专项科研计划( 2013JK0788)”资助《西安地区青少年肥胖和非酒精性脂肪性肝病现状调查及相关危险因素分析》【证据14】
收集2012年3-4月高考前于西安医学院第一附属医院体检的青少年...
结果：共纳入4141例青少年,其中男2080例,女2061例,平均（18.62±0.66）岁。男生超重率和肥胖率均高于女生,差异均有统计学意义（x2值分别为49.5、20.4,P值均〈0.01）;NAFLD总患病率为8.1%（335/4141）,其中男生NAFLD患病率高于女生（13.4%vs 2.8%）,差异具有统计学意义（χ2=156.4,P〈0.01）;NAFLD检出率由高至低依次为肥胖者、体质量超标者、BMI正常者,肥胖男生NAFLD检出率显著高于女生（71.6%vs 29.0%）,差异具有统计学意义（χ2=56.5,P〈0.01）...
结论：西安地区青少年肥胖、NAFLD发病情况不容乐观...
赵鸿馨et al.，西安地区青少年肥胖和非酒精性脂肪性肝病现状调查及相关危险因素分析，临床肝胆病杂志，2015(8)
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-LCGD201508020.htm
10-4 首都儿科研究所流行病室2012年研究：“391名超重与肥胖儿童，NAFLO检出174例，检出率44.5%（174/391)。...肥胖儿童中男孩发生NAFLD的风险是女孩的9.65倍...肥胖儿童伴发NAFLD普遍，肥胖儿童中NAFLD的发生对肝功能造成危害。”
《中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文集》2012年9月收录首都儿科研究所流行病室周歆、侯冬青、赵小元、程红、刘军廷、杨平、米杰《北京市超重与肥胖儿童中非酒精性脂肪肝的检出情况及其相关危险因素的研究》【证据15】
目的：探讨北京市超重与肥胖儿童中非酒精性脂肪肝（NAFLD）的检出情况及其相关危险因素。...
结果：超重与肥胖儿童中有10名儿童血标本非空腹状态。391名超重与肥胖儿童，NAFLO检出174例，检出率44.5%（174/391)。...
进一步进行多因素logistic回归分析发现：... 肥胖儿童中男孩发生NAFLD的风险是女孩的9.65倍（OR=9.64，95%CI:4.66-19.99），黑棘皮症存在儿童患NAFLD的风险是无黑棘皮症儿童高2.8倍（OR=2.81，95%lC:1.38-5.70）。
结论：肥胖儿童伴发NAFLD普遍，肥胖儿童中NAFLD的发生对肝功能造成危害。
周歆et al.，北京市超重与肥胖儿童中非酒精性脂肪肝的检出情况及其相关危险因素的研究，中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文集，2012-09-13
https://d.wanfangdata.com.cn/conference/8580229
10-5 浙江省丽水市“全市中小学校筛查以及2015年10月-2018年10月在丽水市中心医院内分泌科和肥胖专科门诊就诊的肥胖儿童，共160例：...非酒精性脂肪肝（NAFLD）组60例（37.5%）。”
《中国妇幼保健》2020年10月发表丽水市中心医院儿科何春霞、蔡海芳、刘晟、孙增贤、黄晓红获“丽水市科技计划项目 ( 2015ＲC32)”资助《浙西南地区肥胖儿童的非酒精性脂肪肝的发生特点 危险因素及针对性预防措施研究》【证据16】
... 我国儿童的肥胖发病率正逐年升高，为随之而来的非酒精性脂肪肝（NAFLD）培养了充足的 “后备军”。NAFLD 和代谢综合征 ( MS) 关系密切，不仅可以累及血脂、血糖代谢，也危及心脑血管等其他脏器。儿童NAFLD 目前已是儿童最常见的肝病之一。
在全市中小学校筛查以及2015年10月-2018年10月在丽水市中心医院内分泌科和肥胖专科门诊就诊的肥胖儿童,共160例：...非酒精性脂肪肝（NAFLD）组60例（37.5%）。
何春霞et al.，浙西南地区肥胖儿童的非酒精性脂肪肝的发生特点危险因素
及针对性预防措施研究，中国妇幼保健，2020(20)
https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZFYB202020036.htm
11、孟山都公司草甘膦除草剂农达制剂1988年申请“农药登记”提交的毒理学动物试验报告白纸黑字声称“草甘膦除草剂‘农达’...‘三致’试验结果表明该产品无致癌”!
农业部2014年7月28日《农业部信息公开申请答复书》【农公开（农）[2014]12号】【证据17】
2014年6月4日，我部农公开（农）[2014]8号文已就草甘膦除草剂“农达”毒理学试验报告信息公开事宜答复你们，不再重复答复。现将毒理学试验结果和残留、环境质量影响有关信息函告如下。
（一）毒理学试验报告结果：原药急性经口毒性为低毒；亚慢性及慢性毒性试验结果表明，该产品毒性较低；代谢试验表明草甘膦在体内无蓄积性，能较快地从体内排出；“三致”试验结果表明该产品无致癌、致突变和致畸性；每人每天允许摄入量0.1mg/kg bw。“农达”制剂急性毒性为微毒，对家兔眼睛和皮肤无刺激性、无致敏性。...
（三）农达“环境质量影响 对大气、水、土壤、职务和生态系统的污染和影响”：在土壤中易降解，对光稳定，对鱼、蚤、鸟类和水生物低毒，在生物体内易排出，无积蓄现象。
农业部2014年7月28日《信息公开申请答复书》【农公开（农）[2014]12号】扫描件
12、农业部《转基因权威关注》2011年9月转载《关于大豆中草甘膦残留限量标准情况》到现在持续9年坚持不懈竭力宣扬：“在试验条件下对动物未见致畸、致突变、致癌作用。”
农业部《转基因权威关注》2011年9月转载《关于大豆中草甘膦残留限量标准情况》【证据18】
“按我国农药毒性分级，草甘膦原药为低毒。... 大鼠2年慢性喂养试验最大无作用剂量100 mg/kg(体重)/天。... 根据上述实验最大无作用剂量最低值100 mg/kg（大鼠两年慢性喂养试验），除以100倍安全系数，得出人的每日允许摄入量为1 mg/公斤体重。...
“草甘膦作为一种世界范围内广泛使用的除草剂，其毒性是非常低的，就鼠的经口毒性来说，比食盐的还要低。相关研究表明：草甘膦在动物体内不蓄积。在试验条件下对动物未见致畸、致突变、致癌作用。对鱼和水生生物毒性较低；对蜜蜂和鸟类无毒害；对天敌及有益生物较安全。”
陶波，关于大豆中草甘膦残留限量标准情况，农业部《转基因权威关注》，2011-09-19
http://www.moa.gov.cn/ztzl/zjyqwgz/zxjz/201109/t20110919_2290532.htm
13、拜尔公司收购孟山都公司后，草甘膦除草剂2018年向农业部申请续延“农药登记”时，依然谎称“微毒”!
2018年4月，《拜尔公司草甘膦异丙胺盐农药登记（PD73-88）》（有效期至：2023-04-15）【证据19】注明“微毒”、“适用范围及施用方法：茶园、柑橘园、棉花免耕田、棉田行间、桑园、水稻田埂、橡胶园、玉米田（喷雾）”。
中华人民共和国农业农村部农药检定所《中国农药信息网》“农药登记”检索系统（截屏）
http://www.chinapesticide.org.cn/myquery/tagdetail?pdno=PD73-88
14、美国环保署（EPA）官方备忘录证实孟山都1983年与1988年提交了两项代谢研究揭示草甘膦在哺乳山羊与产蛋鸡中有“生物蓄积”致可食用组织草甘膦残留达到“肾脏（3.49-10.5 ppm），肝脏（0.457-0.529 ppm），脂肪和肌肉（0.009-0.011 ppm），奶（0.019-0.086）”。
环保署健康影响分部饮食暴露处容限申请科化学家W. T. Chin博士1989年1月致注册分部与健康影响粪便毒理学处负责人Robert J. Taylor备忘录《大豆中或上边的草甘膦（农达）》【证据20】
申请方（孟山都公司）提交了以下两项新的陈代谢研究：
1.＃405413-1：合成的13C / 14C标签草甘膦和氨基甲基膦酸（AMPA）在哺乳山羊中的代谢研究（1988年2月）
可食用组织中，14C草甘膦残留量的确定如下：肾脏（3.49-10.5 ppm），肝脏（0.457-0.529 ppm），脂肪和肌肉（0.009-0.011 ppm），奶（0.019-0.086）。
2、第＃405413-2号：产蛋鸡中使用合成13C / 14C标签草甘膦和氨基甲基膦酸（AMPA）的代谢研究（1988年2月）
鸡蛋中大多数14C残留物（小于或等于0.244 ppm）在蛋黄中。鸡蛋和组织中的14C残留物大多数是可水提取的。... 第4组肝脏中的14C残留物（400 ppm含量）通过GC / MS确认为草甘膦和AMPA ...。
EPA Memo Glyphosate(Roundup) in or on Soybeans, January 30, 1989
https://archive.epa.gov/pesticides/chemicalsearch/chemical/foia/web/pdf/103601/103601-242.pdf
